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  • 磷酸化iTRAQ/TMT定量蛋白質組學

    蛋白質翻譯後修飾在生命體中具有十分重要的作用. 它使蛋白質的結構更為複雜, 功能更為完善, 調節更為精細, 作用更為專一。 常見的蛋白質翻譯後修飾過程中磷酸化修飾參與生理功能突出,主要涉及細胞信號轉導、神經活動、肌肉收縮以及細胞的增殖、發...

  • 蛋白乙醯化修飾

    氨基酸的乙醯化修飾是一種可逆的在真核細胞和原核細胞中都能表達的翻譯後修飾過程。乙醯化修飾的重要作用,包括DNA-蛋白質相互作用、亞細胞定位、轉錄活性、蛋白質穩定性等等。 蛋白質泛素化修飾過程在人體免疫系統調節過程中起到了關鍵性的作用。...

  • DIA技術

    資料非依賴採集(data independent acquisition,DIA)是近年來備受矚目的質譜採集技術之一,一度引領了定量蛋白質組學新發展。

  • SILAC

    SILAC( Stable Isotope Labeling with Amino acids in Cell culture)技術是依據細胞生長對必需氨基酸的依賴原理,利用穩定同位素標記( 13C,15N,2H)的必需氨基酸對細胞蛋白質組進行代謝標記的方法;13C,15N,2H是穩定同位素,沒有放射性,因此可以...

  • 免疫共沉澱(Co-IP)

    免疫共沉澱(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用於研究蛋白質相互作用的經典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。 當細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞記憶體在的許多蛋白質-蛋白質...

  • EMSA實驗

    凝膠遷移或電泳遷移率檢測是一種檢測蛋白質和DNA序列相結合的技術,最初用於研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用,可用於定性和定量分析。分為2種類型:同位素標記探針,非同位素標記探針。 通常將純化的蛋白和細胞粗提液和32P同位素標...

  • 蛋白純化

    蛋白質的分離純化在生物化學研究應用中使用廣泛,是一項重要的操作技術。 一個典型的真核細胞可以包含數以千計的不同蛋白質,一些含量十分豐富,一些僅含有幾個拷貝。為了研究某一個蛋白質,必須首先將該蛋白質從其他蛋白質和非蛋白質分子中純化出...

  • 酶聯免疫吸附試驗法(ELISA)

    酶聯免疫吸附試驗法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是指以酶作為標記物,以抗原和抗體之間免疫結合反應為基礎的固相吸附測定方法。檢測標本範圍廣泛,如血清、唾液、尿液、糞便等,均可以作為標本檢測其中某種抗體或抗原成分。

  • 免疫印跡(Western Blot,WB)

    免疫印跡(Western Blot,WB)採用聚丙烯醯胺凝膠電泳(SDS-PAGE)對樣品中的蛋白質按照分子量進行分離,轉移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜,NC)上。固相載體可以吸附蛋白質,並保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。轉移後的NC膜就稱為一...

  • 雙向螢光差異凝膠電泳

    DIGE — 雙向螢光差異凝膠電泳(Two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis,2D-DIGE),是在傳統雙向電泳的基礎上發展而來的新型蛋白質組學定量技術,其分離蛋白質混合的原理與雙向電泳是一致的,主要利用蛋白質的等電點和分子量...

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